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第九节 烧伤湿性医疗手艺MEBO的抗菌作用实验研究
作者：中国中西医团结学会烧伤专业委员会 出书社：中国医药科技出书社 刊行日期：2000年6月 【摘要】 视察湿润烧份膏 (MEBO)对有芽孢厌氧菌（破伤风杆菌)、无芽孢厌氧菌（懦弱类杆菌、痤疮丙酸杆菌)和真菌(白色念珠菌) 等的抗菌作用 。将上述细菌划分接种在含 MEBO的琼脂作育基上传代作育，视察MEBO 对细菌的作用 。实验效果 MEBO 使细菌的形态结构作育特征等方面爆发变异，并显着地影响细菌的生长滋生速率和侵袋力 。效果批注 MBBO 具有较强的广谱抗菌作用 。
【要害词】 MEBO 抗菌作用 厌氧菌 真菌 细菌变异
大宗烧伤创伤病人接纳湿润袒露疗法用 MEBO 治疗的临床资料批注，MEBO 具有较强的控制烧伤创面熏染的能力，其作用机制是多方面的 。本实验视察了 MEBO 使厌氧菌芽孢杆菌一破伤风杆菌、无芽孢厌氧菌-懦弱类杆菌和痤疮丙酸杆菌、真菌一白色念珠菌等在形态结构、菌落特点和致病性等方面爆发变异 。实验研究效果批注，烧伤湿润袒露疗法的MEBO具有较强的广谱抗菌作用，又能给子被烧伤破损了的机体局部皮肤组织剩余细胞以维持正常生命的情形和增进破碎再生的条件,是一种具有双向调理作用的药物 。
质料和要领
1.质料 MEBO：北京灼烁中医烧伤创疡研究所研制 。B224 型厌氧作育缸：滨州医学院隶属医院磨练科任全君研制 。厌氧作育基：上海生物制品研究所 。菌种：懦弱类杆菌、痤疮丙酸杆菌，购自上海医科大学 。破伤风杆菌、白色念珠菌，由滨州医学院隶属医院院磨练科提供 。以上细菌经厌氧琼脂作育基传代后备用 。
2.要领及分组
� 。�1）(MEBO 试验组：将四种细菌(懦弱类杆菌、痤疮丙酸杆菌、破伤风杆菌和白色念珠菌)划分接种在含有一定浓度 MEBO 的作育基上 。厌氧菌置于厌氧作育缸 37°C作育48~72h为代 。白色念珠菌置于恒温箱37C作育48~721为一代 。一连传代4~6代，每代举行革蓝染色(Gram's),视察细菌的染色反应及形态巨细、菌落特点等 。
(2)正常比照组：以上四种细菌在接种到含 MEBO 的作育基前（原代菌）举行 Gram's, 视察细菌形态、巨细及菌落特点等 。
检测指标
1.细菌变异征象的视察
(①)视察破伤杆菌、懦弱类杆菌和痤论丙酸杆菌：将上述三种细菌划分接种在含有一定浓度MEBO 的作育基上，举行传代作育后视察每代细菌的形态、菌落等的变异征象 。
(2观祭白色念珠菌在含 MEBO 作育基上的变异征象 。
2.芽管试验
将原代菌及在 MEBO 作育基上传代的1~2代、5~6代白色念珠菌划分接种在0.5ml人血清液体作育基中，置于37°C水浴箱水浴 3h，取菌涂片、染色、计数500个白色念珠菌，求其芽管爆发百分率 。
3.MEBO 对细菌生长速率的影响 将在含有 MEBO 的作育基上传代的第 10代金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和原代金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌用无菌取菌环划分取相同的菌落，研磨于0.1ml 盐水中，再加盐水至 1ml.划分取菌置于血球计数盘上计数细菌数 /ml迓行较量 。
4. MEBQ 对绿脓杆菌侵袭力的影响 取在MEBO 作育基传代作育的第 10代绿脓杆菌和在通俗作育基上作育的原代绿脓杆菌，划分取菌落于盐水中计数、稀释，使其含细菌数为3 ×109/m1 。然后再取菌液划分给小鼠皮内注射0.Iml，201后正法 。于注射细菌部位，由皮肤到肌冉皮肤到肌层，取一长方形组织块，举行牢靠包埋，组织切片，HE染色等 。视察病理转变 。
2.MEBO对白色念珠菌的作用 见表5-9-2 。
讨 论
细菌生长滋生迅速，世代周期短（一样平常20min 为一代) 。因此，有些细菌在滋生历程中易受情形中倒运因素的影响而爆发细菌性状的变异 。如细菌形态结构的变异、作育特征、毒力、抗原性和耐药性等方面的变异 。细菌形态的变异与细菌的破碎有关 。细菌破碎历程是一重大的历程，它对情形中非致死性倒运因素作用的敏感性比卵白质或DNA 合成对有害物质的敏感性更大 。因此，细菌细胞可泛起多形态—多核丝状或圆球状等变异，如破伤风杆菌、懦弱类杆菌 。这是由于细胞壁合成妥影响不可实时形成或断裂，而代谢仍在举行有关 。细菌性状变异的爆发与作用于细菌的倒运因素的强度、作用的时间有亲近关系 。从本实验中清晰地视察到，统一种细菌和在含差别浓度MEBO 的作育基上泛起形态变异的时间及形态变异的特点是有差别的 。
本实验视察了 MEBO 对破伤风杆菌、懦弱类杆菌、痤疮丙酸杆菌和白色念珠菌等的抗菌作用 。这些细菌都是人体正常菌群，属于条件致病菌，在一定条件下可致病，大大都属于内源性熏染 。烧伤病人由于大宗应用抗生素，易造成菌群失调，导致条件致病菌白色念珠菌的熏染，时有报道 。烧伤创面的细菌熏染，需氧菌（如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌等）仍是优势菌 。由于烧伤创面可爆发缺血坏死，也易被漏检 。王德旺 等（1983年)报告 34例烧伤创面厌氧芽孢杆菌作育阳性率为 23.9%，且均为多菌性混淆熏染 。
破伤风杆菌属于厌氧芬孢杆菌，在含 MEBO 的作育基中传代后，泛起长丝状变异，在第3三代有较多的菌体形成芽孢 。我们知道细菌是以二破碎法举行滋生，具有滋生能力的菌体称为滋生体 。一个细菌只形成一个芽孢，一个芽孢在相宜条件下也只天生一个菌体（滋生体），细菌数目并不增多，以是细菌芽孢的形成并非细菌滋生方法，而是细菌对营养缺乏等倒运因素情形的一种反应，此时细菌的生命活动处于休眠状态，代谢缓慢，但芽孢坚持了细菌的生命活动 。芽孢在不相宜因素保存的情形中是不可形成滋生体而举行滋生的 。破伤风杆菌属于厌氧菌，只有在一定条件下细菌才华举行滋生，爆发外毒而致病 。同样，白色念珠菌以出芽方法举行滋生，在含 MEBO 的作育基上传代至第6代，见到芽生孢子较正常念珠菌的芽生孢子要少得多，芽管爆发率由正常的90%降至 0.5%~2% 。由此可见，MEBO对破伤风杆菌、白色念珠菌的生长滋生、致病性等爆发的影响 。
从表5-9-3可见到要含 MEBO 作育基上传代至第10代的绿脓杆菌，经20h作育，菌落的细菌数/ml 与原代细菌相比镌汰约29/30倍，对小鼠机体组织的侵袭力显著降低 。效果说明细茵处于倒运因素的条件下，不但使细菌的形态结构爆发交异，并且它的心理特征也随之爆发了转变 。
实验硏究曾视察了MEBO 对烧伤熏染常见的G+需氧菌金黄色葡萄球菌、G 菌大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌等的抗菌作用，和本实验对G有芽孢厌氧菌（破伤风杆菌）、G无芽孢厌氧菌（痤疮丙酸、懦弱类杆菌）及真菌(白色念珠菌）等的抗菌作用 。实验研究效果和临床研究资料批注，MEBO 是一种具有较强的广谱抗菌作用和增进烧伤创面愈合的双向调理作用的药物 。